胃酶

羊、牛睾丸绞碎提取↓乙酸↓盐酸分段盐析↓硫酸铵

二次盐析↓硫酸铵透析↓缓冲液去热源↓磷酸钠，乙酸钙

过滤干燥成品

将冷冻的羊和牛睾丸用刀切开，剥除内外皮层及副睾丸，绞碎成糜浆。称取糜浆100kg倒入预先配好的冷醋酸液（水90kg，冰醋酸600ml，1mol/L盐酸10L混合而成）中，在-5℃下激烈搅拌3～4min，以后每隔5min搅拌一次，提取4h。然后过滤，得提取液125～140L。浆渣进行第二次提取，提取酸液用量为第一次用量的1/3，合并提取液。在不断搅拌下，每升提取液加硫酸铵210g，完全溶解后，静置1h左右，用涤纶布吊滤过夜，得滤液110L。然后再按每升滤液加入硫酸铵290g，使完全溶解，静置1h，吊滤过夜，得玻璃酸酶粗品。将粗品溶于5L冷蒸馏水中，搅拌下加入硫酸铵125g，使完全溶解，在10℃放置过夜。除去液面脂肪，虹吸出上层清液，并过滤。滤液在不断搅拌下，再缓缓加入硫酸铵750g，使完全溶解，在10℃左右放置过夜。次日吸去上层清液，得盐析物。将盐析物溶入500ml冷的蒸馏水中，装入透析袋，置于25L、pH=65磷酸盐柠檬酸缓冲溶液（柠檬酸75g,Na2HPO4·12H2O60g,氯化钠70g，用水配成2500ml，用柠檬酸调整pH=6.5）中，于约10℃透析24h后过滤，得透析液。透析液于冰浴中冷却，加入15%Na2HPO4·12H2O溶液50ml，在不断搅拌下，缓缓加入20%一水乙酸钙溶液30ml，并以05mol/L氢氧化钠溶液调pH=8.5，继续搅拌10min，减压过滤，滤液以0.5mol/L盐酸调pH=7.0，冷冻干燥，得无热原玻璃酸酶精品。收率为每公斤睾丸得2×104单位以上。