6-溴-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-5-(3R)-3-哌啶基吡唑并[1,5-A]嘧啶-7-胺

肌苷

sch 900776

SCH900776 是一种有效，选择性，可口服的 Chk1 抑制剂，IC50 值为 3 nM；它比对CDK2 和 Chk2 的选择性分别高50和500倍。

信号通路 >> 细胞周期/DNA损伤 >> 检查点激酶(Chk) 研究领域 >> 癌症

Chk1:3 nM (IC50)Chk2:1500 nM (IC50)CDK2:160 nM (IC50)

SCH900776（300nM）显示出针对ser296-Chk1磷酸化的有效抑制活性。 SCH900776（1μM）导致MDA-MB-231细胞中羟基脲的IC50降低30倍[1]。 SCH 900776对CHK1激酶结构域的Kd值为2nM。 SCH 900776在暴露于羟基脲的细胞中表现出约60nM的EC 50。 SCH 900776诱导剂量依赖性抑制CHK1 pS296和伴随的磷酸化RPA信号在U2OS细胞中的积累[2]。

SCH 900776以4mg / kg（ip）诱导γ-H2AX生物标志物，并在A2780异种移植模型中增强肿瘤药效学和回归应答。 SCH 900776（16和32mg / kg，ip）诱导肿瘤反应的逐步改善。将SCH 900776剂量升级至20和50mg / kg与吉西他滨组合导致A2780异种移植系统中TTP 10×的改善[2]。

Kinase Profiler服务用于生成SCH 900776针对广泛的丝氨酸/苏氨酸和酪氨酸激酶的一般选择性数据。测定通常在两种浓度的SCH 900776（0.5和5μM）下以固定的（10μM）ATP浓度进行。

对于细胞生长测定，将细胞以低密度（500-1000个细胞）接种在96孔板中，然后与药物一起孵育24小时（每个浓度8个孔）。处理后，洗涤细胞并在新鲜培养基中于37℃生长5-7天。在达到汇合之前，将细胞洗涤，裂解并用Hoechst 33258染色。在微孔板荧光分光光度计上读取荧光。结果表示为抑制生长50％的药物浓度的平均值和标准误差。

对于肿瘤植入，在体外培养特定细胞系，用PBS洗涤一次并重悬于PBS中的50％基质胶中至终浓度为4×10 7至5×10 7个细胞/ mL。在侧腹区域皮下注射0.1mL该悬浮液的裸鼠。肿瘤长度（L），宽度（W）和身高（H）通过卡尺每周两次测量每只小鼠，然后使用下式计算肿瘤体积：（L×W×H）/ 2。将动物（N = 10）随机分配至治疗组，并用SCH 900776（配制在20％羟丙基β-环糊精中）或单独的化学治疗剂腹膜内处理，按推荐配制。在治疗期间和之后测量肿瘤体积和体重。在归一化至起始体积之前，将数据记录为平均值±SEM。在一些实验中监测进展至10x起始体积（TTP 10x）的时间。对于小鼠中的药效标记物分析，在尸检时收集肿瘤和邻近皮肤，在10％福尔马林中固定过夜，并在70％乙醇中洗涤/储存。对于皮肤穿孔活组织检查，刮削约4平方英寸的面积。使用吸入的异氟烷麻醉大鼠，并使用利多卡因的皮下给药局部麻醉狗。使用4mm活检穿孔器收集样品。将皮肤打孔器在10％福尔马林中固定过夜，然后在70％乙醇中洗涤/储存。

[1]. Montano R, et al. Preclinical development of the novel Chk1 inhibitor SCH900776 in combination with DNA-damaging agents and antimetabolites. Mol Cancer Ther. 2012 Feb;11(2):427-38. [2]. Guzi TJ, et al. Targeting the replication checkpoint using SCH 900776, a potent and functionally selective CHK1 inhibitor identified via high content screening. Mol Cancer Ther. 2011 Apr;10(4):591-602.

1.8±0.1 g/cm3

C₁₅H₁₈BrN₇

376.254

375.080688

86.06000

0.76

1.819