TASIDOTIN 盐酸盐

TASIDOTIN 盐酸盐

(2S)-N-tert-butyl-1-[(2S)-1-[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-(dimethylamino)-3-methylbutanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]-methylamino]-3-methylbutanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]pyrrolidine-2-carboxamide,hydrochloride

Tasidotin hydrochloride 是抗有丝分裂多肽 Dolastatin 15 的肽类似物，作为微管组装和微管动力学的抑制剂。

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Microtubule[1]

与其他乳腺癌细胞系相比，相对较低量的Tasidotin进入NCI / ADR-RES细胞，与Tasidotin也是P-糖蛋白底物一致。在剩余的品系中，对Tasidotin敏感性的最大差异在于更敏感的MDA-MB-435品系和不太敏感的HS 578-T品系。两条线的IC50值分别为4和200 nM [1]。尤文氏肉瘤，横纹肌肉瘤，骨肉瘤和滑膜肉瘤的IC50范围为2至320 nM。在SK-ES1和RH30细胞系中，Tasidotin诱导G2-M阻滞，在从细胞中洗去Tasidotin后持续48小时。在体外，超过一半的细胞在用Tasidotin处理后48小时处于凋亡的早期或晚期。用160nM Tasidotin处理24小时后，RH30系和SK-ES1系各自显示G2-M期细胞的积累。在第24小时，几乎所有RH30细胞都处于G2-M期[2]。

在体内，凋亡细胞核的显着增加在Tasidotin的5天疗程后24小时内收获的异种移植肿瘤中是明显的。用100mg / kg治疗的小鼠具有> 20％的平均体重减轻而没有恢复到其基线起始体重，并且一只小鼠在第二治疗过程之前死亡。用Tasidotin处理5天后，用90mg / kg / d Tasidotin处理的小鼠平均体重减少<16％[2]。

MDA-MB-435和HS 578-T乳腺癌细胞在Corning 75-cm 2培养瓶中的25mL培养基中生长。对于单层细胞，当细胞接近汇合时，将培养基更换为15mL含有指定浓度的0.1μM[3H] Tasidotin的新鲜培养基，并继续培养指定的时间。通过从培养瓶表面刮下单层细胞来收获单层细胞。对于悬浮细胞，当细胞处于对数期并且以约106个细胞/ mL时，以指定的浓度加入[3H] Tasidotin，并且如各个实验中所指定的那样继续孵育指定的时间。通过离心收获悬浮细胞。两种类型的细胞用PBS（pH 7.2）洗涤两次。将细胞重悬于0.5mL水中，并在28W下通过10秒超声处理破碎，然后10秒暂停，总共1分钟。确定所有细胞提取物的蛋白质含量和放射性标记[1]。

通过微量培养四唑鎓方法测定生长抑制。简而言之，将细胞以每孔500个细胞的密度接种在96孔平底微量滴定板中，在100μL培养基中。孵育过夜后，加入100μL含有Tasidotin的培养基以达到规定的最终浓度，最终体积为200μL/孔。在120小时，通过MTT到甲嗪的线粒体转化来测量经处理和未经处理的细胞的相对代谢活性。在药物处理完成时，向每个孔中加入250μgMTT并在37℃，5％CO 2下孵育6小时。将甲脒晶体溶解在DMSO中，并在VERSAmax分光光度计上测量595nm处的吸光度。将吸光度值标准化为载体处理的细胞获得的值，以确定存活百分比。 IC50定义为处理细胞的吸光度为对照的50％的浓度[2]。

小鼠[2] CB17雌性scid - / - 小鼠每天用Tasidotin处理5天，每天21天从第1天开始腹膜内注射，进行两个周期。每个处理组分配五只非荷瘤小鼠。用70,80,90或100mg / kg /天的Tasidotin处理小鼠。有毒事件定义为随机化或死亡时动物体重的重量损失≥20％。最大耐受剂量（MTD）定义为没有发生毒性的最高剂量。

[1]. Bai R, et al. Intracellular activation and deactivation of Tasidotin, an analog of dolastatin 15: correlation with cytotoxicity. Mol Pharmacol. 2009 Jan;75(1):218-26. [2]. Garg V, et al. Preclinical analysis of Tasidotin HCl in Ewing's sarcoma, rhabdomyosarcoma, synovial sarcoma, and osteosarcoma. Clin Cancer Res. 2007 Sep 15;13(18 Pt 1):5446-54.

C₃₂H₅₉ClN₆O₅

643.30100

642.42400

122.37000

3.55270