阿普斯特

阿普斯特

Apremilast

Apremilast 是一种磷酸二酯酶 4 (PDE4) 抑制剂，IC50 为 74 nM。

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IC50: 74 nM (PDE4)[1]

Apremilast抑制脂多糖（LPS）释放TNF-α，IC50为104 nM（pIC50 = 6.98±0.2），这几乎完全复制了先前报道的Apremilast对外周血单核细胞（PBMCs）的TNF-α抑制作用（IC50 = 110 nM）并且其类似于Apremilast对PDE4酶抑制的效力（IC 50 = 74nM）。这些结果与Apremilast通过增加细胞内cAMP水平抑制TNF-α的假设明显一致。 PKA，Epac1和Epac2敲除阻止了Apremilast对TNF-α的抑制和IL-10的刺激[1]。

Apremilast，口服（5 mg / kg），显着抑制空气袋中TNF-α的产生39％（载体的61±6％，P <0.001），并减少（28％）存在的白细胞数量（72载体的±12％，P <0.05）。同意，免疫组织学分析显示Apremilast可显着降低空气囊膜中的中性粒细胞积聚。在鼠气囊模型中，Apremilast和甲氨蝶呤（MTX）均显着抑制白细胞浸润，而Apremilast而非MTX显着抑制TNF-α释放。向Apremilast（5 mg / kg）添加MTX（1 mg / kg）不会比单独使用Apremilast更能抑制白细胞浸润或TNF-α释放[1]。 Apremilast是一种新型口服PDE4抑制剂，已被证明可调节炎症介质。口服Apremilast后，发现平均最大血浆浓度（Cmax）为67.00±14.87ng / mL。 Apremilast的血浆浓度迅速下降并从血浆中消除，终末半衰期为0.92±0.46 h [2]

将原始264.7细胞（100,000）培养在96孔板中。 24小时后，用载体（终浓度为0.025％DMSO）或用指定浓度的Apremilast刺激细胞。 30分钟后，用LPS1μg/ mL刺激细胞4小时。当研究CGS21680，SCH58261，ZM241385，BAY60-6583或GS6201时，在Apremilast之前15分钟加入腺苷受体配体。在Apremilast之前24小时和1小时加入甲氨蝶呤。然后收集上清液并用小鼠TNF-αQuantikineELISA试剂盒定量TNF-α水平。使用GraphPad Prism v6.00 [1]，使用非线性回归，S形剂量反应进行IC50（EC50）计算，将顶部约束至100％，将底部约束至0％，允许可变斜率。

小鼠[1]每周给雄性小鼠腹膜内注射MTX（1mg / kg）或载体（PBS）4周。通过皮下注射3mL无菌空气产生气囊，并在2天后用1.5mL无菌空气再充气。将载体（0.5％羧甲基纤维素和0.25％吐温80）或Apremilast（5mg / kg）口服给药，用注射器通过钝端弯曲的进料管，在第6天通过注射诱导炎症之前24小时和1小时。 1 mL 2％角叉菜胶悬浮液。 4小时后，小鼠被CO2麻醉死亡，并用2 mL PBS收获渗出物。在血细胞计数器室中计数白细胞，并通过ELISA或Luminex平台测量细胞因子的浓度。大鼠[2]雄性Sprague Dawley大鼠（180-220g）用于研究Apremilast的药代动力学。在实验前12小时禁止饮食，但可以免费饮用水。在口服Apremilast后0.25,0.5,0.75,1,1.5,2,3,4,6,8和12小时从尾静脉收集血液样品（0.3mL）到肝素化的1.5mL聚乙烯管中（6.0mg /公斤）。将样品立即以4,000g离心8分钟。将获得的血浆（100μL）储存在-20℃直至分析。通过DAS（药物和统计学）软件分析每只大鼠的血浆Apremilast浓度对时间数据。

[1]. Perez-Aso M, et al. Apremilast, a novel phosphodiesterase 4 (PDE4) inhibitor, regulates inflammation through multiple cAMP downstream effectors. Arthritis Res Ther. 2015 Sep 15;17:249. [2]. Chen LG, et al. Determination of Apremilast in Rat Plasma by UPLC-MS-MS and Its Application to a Pharmacokinetic Study. J Chromatogr Sci. 2016 Sep;54(8):1336-40.

1.4±0.1 g/cm3

741.3±60.0 °C at 760 mmHg

C₂₂H₂₄N₂O₇S

460.500

402.1±32.9 °C

460.130432

130.95000

1.75

0.0±2.5 mmHg at 25°C

1.612