克立咪唑

吡咯咪唑

clemizole

Clemizole是H1受体拮抗剂，还能抑制NS4B的RNA结合及HCV的复制。

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IC50: 24 nM (NS4B)[1] H1 histamine receptor[1]

发现克立咪唑盐酸盐抑制细胞培养物中的HCV RNA复制，其通过抑制NS4B的RNA结合介导，对宿主细胞几乎没有毒性。克立咪唑对W55R突变体J6 / JFH RNA的EC50为~18μM（野生型RNA的EC50的2.25倍）[1]。克立咪唑是TRPC5通道的新型抑制剂。克立咪唑有效阻断TRPC5电流和Ca2 +进入低微摩尔范围（IC50 =1.0-1.3μM）。克立咪唑对TRPC5的选择性比TRPC4β高6倍（IC50 =6.4μM），是TRPC5最接近的结构相对，对TRPC3（IC50 =9.1μM）和TRPC6（IC50 =11.3μM）的选择性几乎是10倍。克立咪唑盐酸盐作为TRPC5的新型阻断剂，半数最大抑制浓度为1.1μM。浓度 - 反应曲线证实了克立咪唑对TRPC5的浓度依赖性阻断，并且显示出明显的IC50为1.1±0.04μM[2]。

克立咪唑盐酸盐具有出乎意料的短血浆半衰期（在0.15小时测量）;它很快被生物转化为葡萄糖醛酸苷（M14）和脱烷基化代谢物（M12），进入C57BL / 6J小鼠的各种代谢产物中[3]。

将Huh7.5细胞维持在补充有1％L-谷氨酰胺，1％青霉素，1％链霉素，1x非必需氨基酸和10％FBS的DMEM中。用0.05％胰蛋白酶-0.02％EDTA处理后，每周两次传代细胞系，并以1：5的稀释度接种。将亚汇合的Huh7.5细胞用胰蛋白酶消化并通过在700g离心5分钟收集。然后将细胞在冰冷的无RNase的PBS中洗涤三次，并以1.5×10 7个细胞/ mL重悬于PBS中。用于电穿孔的野生型或突变体FL-J6 / JFH-5'C19Rluc2AUbi RNA通过使用T7 MEGAscript试剂盒转录XbaI线性化DNA模板，然后纯化（RNA转录和荧光标记）而产生。我们将5μgRNA与400μL经洗涤的Huh7.5细胞在2mm间隙比色杯（BTX）中混合，并立即用BTX-830电穿孔仪脉冲（0.82kV，5次99μs脉冲）。在25℃下恢复10分钟后，将脉冲细胞稀释到10mL预热的生长培养基中。将来自几次电穿孔的细胞合并到普通原种中并接种在6孔板中（每孔5×10 5个细胞）。 24小时后，更换培养基，并在筛选中鉴定的各种抑制性化合物（例如盐酸克立咪唑）的连续稀释液存在下培养细胞。分析了所鉴定的18种市售化合物中的17种。未处理的细胞用作水溶性化合物的阴性对照。对于溶解在DMSO中的化合物（例如盐酸克立咪唑），未处理的细胞在相应浓度的溶剂存在下生长，作为阴性对照。每天更换中等。处理72小时后，对细胞进行基于Alamar Blue的活力测定和荧光素酶测定。处理72小时后，将细胞在10％Alamar Blue试剂存在下于37℃温育3小时。然后扫描平板并使用FLEXstation II 384检测荧光。根据抑制性化合物的溶剂（例如盐酸克立咪唑），水或DMSO，信号相对于未经处理的样品或在DMSO存在下生长的样品进行标准化[1] ]。

小鼠[3]通过口腔克立咪唑给予8只对照NOG小鼠和8只人源化TK-NOG小鼠25mg / kg，并在给药后30分钟收集血液样品。通过口腔克立咪唑给予C57BL / 6J小鼠（每个时间点3只）25mg / kg，并且在给药后15和30分钟以及1,2,4和6小时收集血液样品用于分析。对于DDI研究，给予8只人源化TK-NOG小鼠克立咪唑（口服25mg / kg），有或没有利托那韦（20mg / kg口服），并在给药后30分钟收集血样。在存在或不存在利托那韦（口服20mg / kg）的情况下，还用Debrisoquine（10mg / kg口服）处理这些小鼠中的6只，并在2小时后获得血浆样品用于分析。

[1]. Einav S, et al. Discovery of a hepatitis C target and its pharmacological inhibitors by microfluidic affinity analysis. Nat Biotechnol. 2008 Sep;26(9):1019-27. [2]. Richter JM, et al. Clemizole hydrochloride is a novel and potent inhibitor of transient receptor potential channel TRPC5. Mol Pharmacol. 2014 Nov;86(5):514-21. [3]. Nishimura T, et al. Using chimeric mice with humanized livers to predict human drug metabolism and a drug-drug interaction. J Pharmacol Exp Ther. 2013 Feb;344(2):388-96.

1.3±0.1 g/cm3

506.1±40.0 °C at 760 mmHg

C₁₉H₂₀ClN₃

325.835

259.9±27.3 °C

325.134583

21.06000

5.10

0.0±1.3 mmHg at 25°C

1.656

1.疏水参数计算参考值（XlogP）:4

2.氢键供体数量:0

3.氢键受体数量:2

4.可旋转化学键数量:4

5.互变异构体数量:无

6.拓扑分子极性表面积:21.1

7.重原子数量:23

8.表面电荷:0

9.复杂度:377

10.同位素原子数量:0

11.确定原子立构中心数量:0

12.不确定原子立构中心数量:0

13.确定化学键立构中心数量:0

14.不确定化学键立构中心数量:0

15.共价键单元数量:1

2933990090

2933990090

2933990090. 其他仅含氮杂原子的杂环化合物. 增值税率:17.0%. 退税率:13.0%. 监管条件:无. 最惠国关税:6.5%. 普通关税:20.0%

品名, 成分含量, 用途, 乌洛托品请注明外观, 6－己内酰胺请注明外观, 签约日期

2933990090. heterocyclic compounds with nitrogen hetero-atom(s) only. VAT:17.0%. Tax rebate rate:13.0%. . MFN tariff:6.5%. General tariff:20.0%