溶菌酶

溶菌酶

Lysozyme

Lysozyme from chicken egg white 是鸡蛋中存在的一种溶菌酶，可分解革兰氏阳性菌。

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Bacteria[1]

溶菌酶是一种普遍存在的酶。鸡蛋是最丰富的溶菌酶来源，占蛋白质蛋白质的约3.4％。溶菌酶是天然的抗微生物剂，其水解N-乙酰胞壁酸和在细菌细胞壁的肽聚糖层中发现的N-乙酰葡糖胺之间的β（1-4）糖苷键并引起细胞裂解。溶菌酶的杀菌作用主要限于革兰氏阳性细菌，包括病原体如单核细胞增生李斯特氏菌和某些梭菌属物种以及一些腐败生物，包括嗜热孢子形成细菌和某些酵母。革兰氏阴性细菌由于其复杂的细胞壁结构而对溶菌酶作用更具抗性[1]。

为了测量每种pH，温度和CO 2条件下蛋清中的裂解活性，从当地杂货店获得的鸡蛋（2打鸡蛋）中随机选择鸡蛋。为了确定加入的蛋清量以获得0.001％溶菌酶浓度，证明鸡蛋清含有约3.4％溶菌酶。为了测定蛋清活性，将0.030g蛋白加入到100mL缓冲溶液中。这相当于约0.001％溶菌酶的浓度。此外，蛋清含有天然存在的其他抗菌蛋白质，如引言部分[1]中所述。

[1]. Banerjee P, et al. Influence of carbon dioxide on the activity of chicken egg white lysozyme. Poult Sci. 2011 Apr;90(4):889-95.

C₁₅H₂₀O₄

2899.27014

powder | white

Soluble in water at 10mg/ml.

1. 性状：白色或微白色冻干粉

2. 密度（g/mL,25℃）：1.01

3. 相对蒸汽密度（g/mL,空气=1）：未确定

4. 熔点（ºC）：未确定

5. 沸点（ºC,常压）：未确定

6. 沸点（ºC，0.05mmHg）：未确定

7. 折射率：未确定

8. 闪点（ºC）：未确定

9. 比旋光度（º）：未确定

10. 自燃点或引燃温度（ºC）：未确定

11. 蒸气压（20ºC）：未确定

12. 饱和蒸气压（kPa,60ºC）：未确定

13. 燃烧热（KJ/mol）：未确定

14. 临界温度（ºC）：未确定

15. 临界压力（KPa）：未确定

16. 油水（辛醇/水）分配系数的对数值：未确定

17. 爆炸上限（%,V/V）：未确定

18. 爆炸下限（%,V/V）：未确定

19. 溶解性：溶于水，不溶于乙醚和丙酮，

Eyeshields;Gloves;half-mask respirator (US);multi-purpose combination respirator cartridge (US)

B

S22;S24/25

NONH for all modes of transport

3

OL5989850

溶菌酶在等电点以下较广泛的pH值范围内，分子带正电荷，可吸附于弱酸性阳离子交换树脂上，洗脱后盐析，可得溶菌酶沉淀，再进行精制可得成品。

蛋清吸附↓724树脂洗涤↓缓冲液洗脱↓硫酸铵溶液盐析透析

去碱性蛋白↓NaOH冻干溶菌酶冻干粉沉淀干燥溶菌酶

在5～10℃下，将新鲜蛋清540kg加入到已处理好的80kg 724树脂中，搅拌吸附6h，在0～5℃静置过夜。倾出上层蛋清，树脂离心甩干，用蒸馏水反复洗去黏附的卵蛋白，然后将树脂装入柱内，用015mol/L、pH=65磷酸缓冲溶液约150L洗涤树脂，再用约600L的10%硫酸铵溶液洗脱，收集洗脱液。洗脱液中加硫酸铵，使最终含硫酸铵量为40%，有白色沉淀生成，冷处放置过夜。虹吸上层清液，沉淀吸滤抽干，再用1倍蒸馏水溶解沉淀呈稀糊状，然后装入透析袋，在约5℃的条件下，对蒸馏水透析24h左右，中间换水2～3次。离心去除沉淀，沉淀再用少量水洗一次，洗液与离心液合并。再往透析清液中慢慢加入1mol/L氢氧化钠溶液，同时不断搅拌，使pH值上升到80～90，如有白色沉淀，即离心除去。然后用3mol/L盐酸调pH=50，冷冻干燥，即得白色片状溶菌酶。也可将离心液用3mol/L盐酸调pH=35，在搅拌下缓慢加入5%的固体氯化钠，在约5℃的温度下静置48h，离心，沉淀用0℃丙酮洗涤，干燥，即得溶菌酶。