VE-821

3-氨基-6-[4-(甲基磺酰基)苯基]-N-苯基-2-吡嗪甲酰胺

3-amino-6-(4-methylsulfonylphenyl)-N-phenylpyrazine-2-carboxamide

VE-821 是一种有效的 ATP 竞争性的 ATR 抑制剂，Ki/IC50 为 13 nM/26 nM。

信号通路 >> 细胞周期/DNA损伤 >> ATM/ATR 信号通路 >> PI3K/Akt/mTOR 信号通路 >> ATM/ATR 研究领域 >> 癌症

ATR:13 nM (Ki)ATM:16 μM (Ki)DNA-PK:2.2 μM (Ki)PI3Kγ:3.9 μM (Ki)

VE-821对ATR具有出色的选择性，与相关的PIKKs ATM，DNA-PK，mTOR和PI3Kγ（分别为16μM，2.2μM，>1μM和3.9μM的Kis）的交叉反应性最小，并且对大量的不相关的蛋白激酶[1]。 VE-821（化合物27）也抑制ATM和DNA-PK，IC50分别>8μM和4.4μM[2]。在正常氧和缺氧条件下，VE-821显着增强PSN-1，MiaPaCa-2和原发性PancM胰腺癌细胞对辐射和吉西他滨的敏感性。 VE-821的ATR抑制导致癌细胞中辐射诱导的G2 / M停滞的抑制。在PSN-1和MiaPaCa-2细胞中，1μMVE-821在照射后2小时用吉西他滨（100nM），放射线（6Gy）或两者处理后抑制Chk1（Ser345）的磷酸化[3]。 。

使用辐射 - 磷酸盐掺入测定法测试化合物（例如，VE-821）抑制ATR，ATM或DNAPK激酶活性的能力。制备由适当的缓冲液，激酶和靶肽组成的储备溶液。向其中加入不同浓度的目标化合物在DMSO中至最终DMSO浓度为7％。通过加入适当的[g-33P] ATP溶液开始测定，并在25℃温育。在所需的时间过程后，通过分别加入磷酸和ATP至终浓度100mM和0.66μM，停止测定。将肽捕获在磷酸纤维素膜上，制备，并用200μL100mM磷酸洗涤六次，然后加入100μL闪烁混合物并在1450 Microbeta液体闪烁计数器上进行闪烁计数。使用GraphPad Prism软件分析剂量 - 反应数据[2]。

将MiaPaCa-2，PSN-1和Panc1细胞（5×104）接种在96孔板中，4小时后用1μL浓度的增加浓度的VE-821处理，然后用4Gy单剂量照射。在照射后72小时更换培养基，此时使用Alamar Blue测定法测量活力。允许细胞增殖，并且在第10天再次分析细胞活力以用于不同的治疗条件。将细胞活力和存活分数标准化为未处理（对照）组[3]。

[1]. Reaper PM, et al. Selective killing of ATM- or p53-deficient cancer cells through inhibition of ATR. Nat Chem Biol. 2011 Apr 13;7(7):428-30. [2]. Charrier JD, et al. Discovery of potent and selective inhibitors of ataxia telangiectasia mutated and Rad3 related (ATR) protein kinase as potential anticancer agents. J Med Chem. 2011 Apr 14;54(7):2320-30. [3]. Prevo R, et al. The novel ATR inhibitor VE-821 increases sensitivity of pancreatic cancer cells to radiation and chemotherapy. Cancer Biol Ther. 2012 Sep;13(11):1072-81. [4]. Muralidharan SV, et al. BET bromodomain inhibitors synergize with ATR inhibitors to induce DNA damage, apoptosis, senescence-associated secretory pathway and ER stress in Myc-induced lymphoma cells. Oncogene. 2016 Sep 8;35(36):4689-97.

1.4±0.1 g/cm3

568.4±50.0 °C at 760 mmHg

C₁₈H₁₆N₄O₃S

368.410

297.6±30.1 °C

368.094299

126.91000

2.93

0.0±1.6 mmHg at 25°C

1.658

NONH for all modes of transport