他拉唑帕利

(8S,9R)-5-氟-8-(4-氟苯基)-2,7,8,9-四氢-9-(1-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)-3H-吡啶并[4,3,2-de]酞嗪-3-酮

bmn 673

Talazoparib (BMN-673) 是高效的 PARP1/2 抑制剂，Ki 值分别为 1.2 nM 和 0.87 nM。

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PARP2:0.87 nM (Ki)PARP1:1.2 nM (Ki)

Talazoparib（BMN 673）表现出优异的效力，抑制PARP1和PARP2酶活性，分别为Ki = 1.2和0.87 nM [1]。 Talazoparib（BMN 673）具有选择性抗肿瘤细胞毒性，并且引发DNA修复生物标志物的浓度远低于早期的PARP1 / 2抑制剂（如Olaparib，Rucaparib和Veliparib）[2]。

Talazoparib（BMN 673; 1mg / kg，口服）可口服，在口服给予单剂或与其组合后，在BRCA1突变体MX-1乳腺癌异种移植模型中显示出有利的药代动力学（PK）性质和显着的抗肿瘤功效。化疗药物如替莫唑胺和顺铂[1]。塔拉唑巴（BMN 673）易于口服生物利用，当在羧甲基纤维素中给药时，大鼠的绝对口服生物利用度超过40％。 Talazoparib的口服给药引起显着的抗肿瘤活性，由于BRCA突变或PTEN缺乏导致DNA修复缺陷的异种移植肿瘤对小鼠耐受良好的口服Talazoparib治疗非常敏感[2]。

使用PARP1测定试剂盒评估测试化合物抑制PARP1酶活性的能力。使用GraphPad Prism5软件计算IC 50值。对于PARP抑制剂Ki测定，酶测定在96孔FlashPlate中进行，其中含有0.5U PARP1酶，0.25x活化DNA，0.2μCi[3H] NAD和5μM冷NAD，终浓度为50μL，含有反应缓冲液10％甘油（v / v），25mM HEPES，12.5mM MgCl 2,50mM KCl，1mM二硫苏糖醇（DTT）和0.01％NP-40（v / v），pH 7.6。通过在有或没有抑制剂的情况下将NAD加入到PARP反应混合物中并在室温下温育1分钟来引发反应。然后向每个孔中加入50微升冰冷的20％三氯乙酸（TCA）以淬灭反应。将板密封并在室温下再摇动120分钟，然后离心。绑定到FlashPlate的放射性信号使用TopCount确定。使用来自各种底物浓度（1-100μMNAD）的Michaelis-Menten方程测定PARP1 Km。根据下式，由酶抑制曲线计算化合物Ki：Ki = IC50 / [1+（底物）/ Km]。 PARM2酶和化合物Ki的Km用相同的测定方案测定，除了在室温下将30ng的PARP2,0.25x活化的DNA，0.2μCi[3H] NAD和20μM的冷NAD用于反应30分钟[ 1]。

在单药试验中，将Capan-1细胞（BRCA2缺陷型），MX-1（BRCA1缺陷型）细胞或其他培养细胞以密度接种，允许在96孔板中线性生长10-12天（通常500-3000个细胞/孔）。将细胞在其推荐的含有不同浓度的PARP抑制剂（Veliparib，Rucaparib，Niraparib，Olaparib和Talazoparib）的生长培养基中处理10-12天（每5天用新鲜化合物更换培养基）。使用GraphPad Prism5 [1]计算IC50值。

制备小鼠[1] MX-1肿瘤异种移植物。当肿瘤达到约150mm 3的平均体积时，以单剂量给予奥拉帕尼（100mg / kg），他唑巴肽（1mg / kg）或载体。在药物给药后2小时，8小时和24小时收获肿瘤并在液氮中快速冷冻。然后将肿瘤组织在PBS中在冰上匀浆并用裂解缓冲液（25mM Tris，pH 8.0,150mM NaCl，5mM EDTA，2mM EGTA，25mM NaF，2mM Na 3 VO 4,1mM Pefabloc，1％Triton X）提取。 -100，和含有1％SDS的蛋白酶抑制剂混合物）。使用PARP体内PD测定II试剂盒通过ELISA测定肿瘤裂解物中PAR的水平。

[1]. Wang B, et al. Discovery and Characterization of (8S,9R)-5-Fluoro-8-(4-fluorophenyl)-9-(1-methyl-1H-1,2,4-triazol-5-yl)-2,7,8,9-tetrahydro-3H-pyrido[4,3,2-de]phthalazin-3-one (BMN 673, Talazoparib), a Novel, Highly Potent, and Orally Efficacious Poly(ADP- [2]. Shen Y, et al. BMN 673, a novel and highly potent PARP1/2 inhibitor for the treatment of human cancers with DNA repair deficiency.Clin Cancer Res. 2013 Sep 15;19(18):5003-15.

1.6±0.1 g/cm3

C₁₉H₁₄F₂N₆O

380.351

380.119720

88.75000

1.91

1.775