胍盐IVD原材料家族成员
扫码登记、鼻拭子、咽拭子采样、保存、转运、检测-核酸检测流程随着疫情常态化防控为大众所熟悉。有效的病毒保存是准确核酸检测结果的重要保障,构建稳定高效的病毒保存液,作为病毒的采集、运输保存及检测的溶液介质是其中关键。
01病毒保存液种类
目前病毒保存液分为两种,灭 活型及非灭活型,两种方式各有特点,非灭活型不含裂解盐,但是保存的病毒完整性更好,检出率更高,除了核酸检测外还可以用于其他研究;灭活型病毒保存液则使用上更安全,操作环境要求也不用那么严格。
1非灭活型病毒保存液
目前研究的非灭活病毒保存液的成分主要为Hank's液基础,添加BSA、氨基酸、维生素等病毒所需的营养成分以及生物缓冲剂、冷冻保护剂、甘油等多种组分,可在较宽的温度范围内维持病毒的活性,最大程度保持样本的原始性,可以用于病毒的核酸提取检测、病毒的培养和分离。
2灭活型病毒保存液
添加有裂解盐的病毒保存液就是灭活型的病毒保存液,通过将采集到的样本与病毒裂解液和病毒核酸保存液进行充分混合,实现对样本中病毒的灭活,同时有效保证样本中的病毒核酸完整性,采集后的标本能够在常温条件下运输和长期保存。保存的病毒RNA样本可广泛应用于基因检测、酶联免疫法检测(ELISA)、PCR检测等。灭活保存液有含胍盐、非胍盐及直扩之分,其中以胍盐型为最常用。
02胍盐裂解保存原理
高浓度的胍盐,是一类强力的蛋白质变性剂,可以破坏核酸与蛋白质之间的次级键,使核蛋白解联从而把病毒核酸释放出来。可以直接裂解灭活病毒,不需要加热处理样本,简便快捷,目前最常用于病毒裂解的胍盐时异硫氰酸胍、盐酸胍,他们无RNA酶和DNA酶活性,能够破坏RNA酶的分子结构,使样本中可能存在的核酸酶失活,起到稳定保存病毒样本的作用。